PCR基因诊断技术
　　

　　PCR是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法，实际上是通过试管反应使极少量的基因组DNA或RNA样品中的特定基因片段，在短时间内扩增上百万倍。PCR技术目前已经发展为生命科学实验室的常规技术。常见的PCR技术有下面几种：
膜结合PCR、锚定PCR、固着PCR、原位PCR、不对称PCR、巢式PCR以及定量PCR等等。
PCR技术具有与众不同的特点：
1、 特异性高：PCR检验是以探测基因为目标，属“病因诊断”，因而针对性强，它直接反映病原体的存在与否。
2、 灵敏度高：PCR扩增中，其产物以指数级迅速增加，很容易将pg量级的起始被检物扩增到ug水平，灵敏度极高，可达fg级，理论上可检出一个细菌或一个真核细胞的单拷贝基因的存在。
3、 速度快捷：PCR每一个周期只需数分钟，加上商品化试剂盒的开发，PCR检验快速省时，一般在4小时内可得出结果，发出检验报告。
4、 对样品要求低：由于PCR的高灵敏度和特异性，只要标本中含极微量的靶DNA或RNA，通过简单去蛋白处理，即可用于PCR试验并得出正确结果，标本无需特殊采集、储存、处理条件，甚至低温保存多年的陈旧标本都可用于PCR扩增。
目前，我院开展的主要为荧光定量PCR技术，其特点在于在PCR过程中利用荧光染料在光刺激下释放的荧光能量的变化反映出PCR扩增产物量的变化，荧光信号变量和扩增产物变量成正比，并通过足够灵敏的自动化仪器实现对荧光的采集和分析以达到对原始模板量定量的目的。
我院目前开展的项目有：
1、 HBV-DNA检测：通过检测患者血清中的乙肝病毒DNA含量来准确地判断患者体内病毒的复制情况，用于乙肝的感染诊断以及乙肝患者抗病毒药物治疗的疗效观察。
2、 HCV-RNA检测：目前HCV的检测主要采用ELISA检测患者血清中的HCV抗体，但因临床标本中HCV抗体的滴度通常很低，抗体出现较晚，HCV变异较大等，而不能早期诊断，漏诊和假阳性较高，而且抗HCV阳性只表明有过HCV感染，不能显示血中是否有病毒存在，即是否有传染性。利用PCR技术可以从极低病毒含量的标本中检测出HCV的RNA，对丙肝的诊断、预防及HCV与肝癌的关系研究等具有重要意义。
3、 TB-DNA检测：由于结核杆菌培养时间较长，难度较大，目前临床上主要采用检测TB抗体的方法，造成假阳性较多。利用PCR方法可以快速准确的检出患者标本中是否有结核杆菌存在。
4、 HBV-DNA YMDD突变检测：目前，临床上使用拉米夫定治疗乙肝的患者越来越多，由于使用拉米夫定治疗极易产生YMDD突变，从而造成患者对拉米夫定的耐药。因此利用PCR检测患者的YMDD突变，可以指导临床用药。
5、 人类乳头状瘤病毒（HPV6，11-DNA）检测、巨细胞病毒（CMV-DNA）检测、单纯疱疹病毒（HSV-DNA）检测、解脲支原体（UU-DNA）检测、沙眼衣原体（CT-DNA）检测、白血病融合基因检测等等。